Sağlam Süt Dişi Dentininde Jelatinolitik Aktivite Tespiti

GİRİŞ ve AMAÇ: Bu çalışmanın amacı süt dişlerine ait dentin dokusundaki intrinsik jelatinolitik aktivitenin direkt olarak ve aktivitesinin uyarılarak artırılıp saptanmasıdır.
YÖNTEM ve GEREÇLER: On dokuz adet süt dişinden elde edilen sağlam dentin dondurulup pulverize edilerek ince bir toz haline getirilmiştir. Floresin bağlanmış jelatin DQ (Gelatin EnzCheck gelatinase/collagenase kit, Molecular Probes, Eugene, OR, ABD) jelatinolitik enzim substratı olarak kullanılmıştır. İntrinsik jelatinolitik enzim aktivitesi 4- Aminophenylmercuric acetate (4-APMA, Sigma-Aldrich International GmbH) kullanılarak aktive edilmiştir. 96’lı mikropetri içerisine koyulan örneklerin floresans emisyon miktarı (FEI), 535 nm eksitasyonda 24 saat boyunca petri okuyucu spektrofotometre ile kaydedilmiştir (Victor 5 Multilabel Plate Reader, PerkinElmer Life Sciences, Boston, MA, USA).
BULGULAR: Süt dişlerinde sağlam detine ait jelatinolitik aktivite tespit edilmiştir (981,59±115), ve 4-APMA maddesine maruz kalan dentin istatistiksel olarak daha fazla jelatinolitik aktivite göstermiştir (1961,78±204), (p<0,05).
TARTIŞMA ve SONUÇ: Jelatinolitik enzimler süt dişleri dentininde mevcuttur ve 4-APMA ile aktiviteleri artırılabilmektedir. Yani, jelatinolitik enzimlerin etkinliklerini artıracak bir durumda dentin dokusunda yıkım oluşması muhtemeldir.

Detection of Gelatinolytic Activity in Deciduous Sound Dentin

INTRODUCTION: The purpose of present study was to demonstrate the intrinsic gelatinolytic activty in sound dentin of primary teeth by detecting and stimulating the activity of these enzymes.
METHODS: Sound dentin from 19 extracted primary teeth were collected and cryo-pulverized into a fine powder. Fluorescein conjugate-gelatin DQ Gelatin EnzCheck gelatinase/collagenase kit (Molecular Probes, Eugene, OR, USA) was used as the cleavage substrate. Intrinsic gelatinolytic enzymes were activated by treating sound dentin powder with 4-Aminophenylmercuric acetate (4-APMA, Sigma-Aldrich International GmbH). A full day (24 h) continuous record of fluorescence emission intensity (FEI) was targeted at 535 nm using 96-well plate reader spectrophotometer (Victor 5 Multilabel Plate Reader, PerkinElmer Life Sciences, Boston, MA, USA).
RESULTS: Gelatinolytic activity was detected in sound dentin of primary teeth (981,59±115) and 4-APMA treated dentin exhibited higher gelatinolytic activity (1961,78±204), p<0,05.
DISCUSSION AND CONCLUSION: Gelatinolytic enzymes are present in sound dentin of primary teeth and their activity is enhanced with 4-APMA. So, sound deciduous dentin possesses gelatinolytic enzymes which may lead to self-destruction if exposed to conditions that induce their activation.